保存菌种的方法

液体石蜡保存法

液体石蜡保存法就是在斜面菌种或穿刺菌种表面覆盖一层液体石蜡，从而隔绝空气，减少菌种及培养物水分挥发，保藏温度要求在4℃下即可。

将培养好的菌种斜面，缓慢倒入无菌的液体石蜡，使石蜡高出斜面顶端1厘米，直立放置，低温保存就可以，霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年。

沙土保存法

沙土保藏法是将菌种吸附在适当的载体上，而后进行干燥的保藏。将培养好的菌种接入沙土管内，用真空泵抽气至干。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。

甘油管保存法

甘油管保存是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。配置30%浓度的无菌甘油，将培养好的菌种与甘油充分混合均匀，放入-20℃保存。

冷冻干燥保藏法

冷冻干燥保存法就是将菌种与保护剂混合均匀后，快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分，兼具低温、干燥、除氧三方。干燥后的菌种在真空环境下可长期保存。

保存菌种的方法有哪些

菌种的保存方法

低温存法

1.简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。

脱水存法

1.沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

2.石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

3.冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

甘油保存菌种的方法

菌种的保存通常采用甘油低温保存法

基本原理 在0℃——70℃或液氮中冻存细菌内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。在0℃——70℃温度范围内水晶呈针状极易招致细菌的严重损伤。用电镜观察,可见细菌的核膜上有大量针尖样小孔。因此为了避免冰晶的形成和细菌膜两侧离子平衡的破坏,需要加保护剂.甘油可降低冰点在缓慢的冻结条件下,能使细菌内水分在冻结前透出细菌外。贮存在低温中能减少冰晶形成甘油对细菌无毒性分子量小,溶解度大,易穿透细菌。

保存菌种的方法是什么

菌种保存的方法有斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、滤纸保藏法、甘油管保存法、冷冻干燥保存法。1、斜面低温保藏法：将菌种接种到适合的固体斜面培养基上，用油纸将棉塞部分包扎好，然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。2、液体石蜡覆盖保藏法：使用液体石蜡将斜面菌覆盖住，使其和空气隔绝。萊垍頭條

一、菌种保存的方法有哪些頭條萊垍

1、斜面低温保藏法萊垍頭條

（1）将菌种接种到适合的固体斜面培养基上，等到菌种充分生长过后，使用油纸将棉塞部分包扎好，然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。垍頭條萊

（2）如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌，一般可以保存2-4个月左右，需要移种一次。如果是酵母菌，一般可以保存2个月左右，需要每个月移种一次。條萊垍頭

2、液体石蜡覆盖保藏法萊垍頭條

（1）将液体石蜡装在三角烧瓶中，并使用棉塞塞好，用牛皮纸进行包扎，然后在0.1MPa，121.3℃的环境下灭菌30分钟左右，接着将其放置在40℃的温箱之中，将水汽蒸发掉。萊垍頭條

（2）将需要保藏的菌种，用适合的斜面培养基进行培养，得到健壮的孢子或者是菌体。垍頭條萊

（3）使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出，注入斜面上，用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。萊垍頭條

（4）将试管直立，放置在低温或者是室温之下进行保存。垍頭條萊

（5）霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死，酵母菌可以保藏1-2年，一般无芽孢细菌可以保藏1年，脑膜炎球菌可以保藏3个月左右（37℃环境下）。萊垍頭條

3、沙土保藏法萊垍頭條

（1）准备好河沙，加入10%稀盐酸，然后加热煮沸30分钟左右，将里面的有机质去掉，然后将酸水倒掉，用自来冲洗至ph为中性，接着烘干，过筛（40目筛子），去掉粗颗粒。垍頭條萊

（2）准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，浸泡洗涤数次，直至ph为中性，然后烘干，碾碎，过筛（100目筛子），去掉粗颗粒。垍頭條萊

（3）将沙和土按照2：1的比例混合，装入试管或者是安瓿管中，塞好棉塞，在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。條萊垍頭

（4）将菌种在斜面培养基中培养，得到健壮的菌体，然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水，洗下细胞或孢子制成菌悬液。萊垍頭條

（5）使用灭菌过的吸管吸取菌悬液，然后均匀滴入沙土管中（0.2-0.5ml/管）。如果是放线菌或霉菌，可以直接挑取孢子拌入沙土管中。條萊垍頭

（6）真空抽去沙土管中的水分。萊垍頭條

（7）将沙土管用火焰熔封，然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏，或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好，放置在干燥器内保存。萊垍頭條

保存菌种的方法选修一

斜面低温保存法

这是最简便最普通的保存方法。即将菌丝生长良好的斜面菌种,置于冰箱内;在4℃左右低温下保存;以后每隔2~3个月转管移接一次。这种保存方法适于大多数食用菌菌种。

为了延长保存时间,试管口处要用塑料薄膜包扎,以防培养基干固。在农村没有冰箱设备的,可把母种试管,用石蜡封口,再用塑料薄膜包封,沉放于清凉的井底保存。

2.液体石蜡保存法

食用菌的菌丝体都可用此法保存,方法简单,只在斜面菌种试管内,注入一层已灭过菌的液体石蜡,注入量以高出斜面1厘米为宜,使菌种与空气隔绝,降低其新陈代谢的活动,然后在棉塞外包以塑料薄膜,直立存放于室内干燥处或低温下保存,一般可保存一年以上。

使用液体石蜡菌种时,只要用接种计从斜面上挑取少许菌体,放在新鲜的培养基上;经过培养,即可应用。原种则重新蜡封,继续保存。

保存菌种的方法高中生物

将需要保藏的菌种，接种在适宜的斜面培养基上，菌丝长满斜面时，用硫酸纸包扎棉塞或者用无菌硅胶塞代替棉塞，置4℃的冰箱中保藏，叫做斜面（菌种）低温保藏法。由于微生物的新陈代谢活动未停止，试管内培养基易失水变干。因此，低温保藏法的保藏时间较短，不适于长期保藏。每隔3～6个月应转管一次。

保存菌种的方法中不适合半年以上时间的保存方法

菌种甘油保存方法

1、将要保存菌种接种于LB液体培养至对数生长期(肉眼见培养体系内浑浊即可）

2、将甘油稀释至浓度为50%(等体积蒸馏水加等体积甘油,甘油需要慢慢吸）

3、将甘油、2ml离心管,枪头等试验用品于121℃灭菌20min

4、无菌条件下将菌液与50%浓度甘油1:1等体积混合于离心管中,甘油终浓度为25%

5、于20℃冰箱内保存有效期1年，再次使用钱30°水浴后接种到固体培养基上即可。正常是直接把保藏液接到液体培养基中,让后生长2448h后,将菌液再次转接到新的液体培养基中新的菌液就可以划线培养了，原始菌种不够的情况下先扩繁十个固体培养基，如果用菌液的话接种到液体培养基上，步骤是固液液用第二个实验第三个保存。

保存菌种的方法高中

应该是甘油管藏法，是一种可长期保存菌种的方法。

保存菌种的方法不属于培养基保存法的是

临时保藏法：将菌种接种到固体斜面培养基上，然后在适宜的温度下进行培养，当菌落长成之后，将试管放置于冰箱中（4°C）进行保藏即可。甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。

甘油管冷冻保藏法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与菌液充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8：2的甘油-生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。